Arbeitsblatt 4.2: Ein Absorptionsphotometer für den Unterricht an Schulen (5/6)

Messung der Extinktion

Grundsätzlich kann der Absorptionskoeffizient durch Einzelmessungen von Intensitätsspektren und ihre Verrechnung bestimmt werden, wie es auf der Seite zur Auswertung von Photometerdaten ausführlich dargestellt ist. In ähnlicher Weise kann auch der dekadische Extinktionskoeffizien und die Extinktion berechnet werden. Das Dunkelstromspektrum muss von jedem Referenz- und Probenspektrum subtrahiert werden.

Photometer read file Die Software des Photometers ermöglicht jedoch, alle Messungen und Rechenschritte automatisiert durchzuführen, um Spektren der Extinktion zu erhalten. Die Prozedur wird mit einem Klick auf das links gezeigte Symbol eingeleitet (A steht für Absorbance). Der anschließende Dialog führt zu den folgenden Datenfenstern.

Erster Schritt: Noch ohne Küvette im Küvettenhalter wird ein Intensitätsspektrum gemessen und hinsichtlich möglicher Übersteuerung geprüft. Mit "Set Automatically ..." kann die Integrationszeit optimiert werden.

Zweiter Schritt: Das Spektrum des Dunkelstroms wird bestimmt. Hierfür wird das Winkelblech so in den Küvennhalter gelegt, dass der Strahlengang unterbrochen ist, oder die Lampe von der Stromversorgung getrennt.

Dritter Schritt: Die Küvette wird in den Halter eingesetzt und mit der Referenzflüssigkeit befüllt. Die Lampe wird wieder in Betrieb genommen und das Referenzspektrum gemessen.

Vierter und letzter Schritt: Die Referenzflüssigkeit wird entnommen und die Probe eingefüllt. Ab jetzt werden dunkelstromkorrigierte Spektren der Extinktion gemessen. Das hier gezeigte Beispiel zeigt das Extinktionsspektrum der Chlorophyll-Probe, deren Intensitätsspektrum an früherer Stelle zu sehen war.